項目

驗證結果

專屬性

①統適用性良好，峰形、峰純度、柱效參數等符合要求。

②在酸、堿、高溫、氧化各破壞條件下的主峰峰純度角均小于純度閾值，主峰峰純度良好，破壞后的主峰與各雜質峰均能有效分離，分離度均大于1.5。

③供試液加入起始原料、反應試劑、副產物及中間體等，均可有效檢出，并良好分離。

線性和范圍

①質A濃度在0.036μg/ml～1.204μg/ml范圍內，線性關系良好（n=8）；y=13703x-174.83；R²＝0.9991。

②雜質B濃度在0.089μg/ml～1.192μg/ml范圍內，線性關系良好（n=7）；y=10941x-517；R²＝0.9995。

③雜質C濃度在0.299μg/ml～4.784μg/ml范圍內，線性關系良好（n=7）；y=13257x-492.44；R²＝0.9999。

④主藥濃度在0.3μg/ml～4.8μg/ml范圍內，線性關系良好（n=6）；y=15008x+565.48；R²＝0.9999。

靈敏度

雜質A、B、C及主藥最低檢出限分別為0.012ng、0.030ng、0.12ng和0.12ng；定量限分別為0.036ng、0.090ng、0.36ng和0.36ng。

準確度

已知雜質加樣回收率98.8%～101.1%；雜質對照品外標法、加校正因子的主成分自身對照法的測定結果基本一致。

精密度

①統精密度良好：對照品溶液主峰峰面積和保留時間的相對標準偏差均小于1.0%。

②重復性良好：雜質A、B、C，其它最大單個雜質及總雜質含量的相對標準偏差均小于1.0%。

③中間精密度良好：人員A、B分別用儀器Ⅰ、Ⅱ所測得的12個樣品中雜質A、B、C，最大單一雜質及總雜質含量的相對標準偏差均小于1.0%。

溶液穩定性

供試品溶液2-8℃條件下放置14個小時測得的主藥、雜質A、B、C各主峰峰面積的相對標準偏差均小于5%，各峰保留時間的相對標準偏差均小于1.0%，供試液2-8℃條件下放置14個小時穩定。均無新增雜質出現。

耐用性

微調流速、柱溫、檢測波長，系統適用性溶液中雜質A與雜質B的分離度均大于1.0；使用不同品牌、長短、內徑、填料粒徑色譜柱，雜質A、B分離度均大于1.0，各雜質峰相對保留時間基本穩定。

相對響應因子驗證

通過測定計算所得雜質A、B、C相對響應因子與USP質量標準中的相對響應因子基本一致。